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淺談C4反相色譜柱的平衡與保護

更新時間:2017-06-27瀏覽:1860次
C4反相色譜柱在經過出廠測試后是保存在乙腈-水中的;由于色譜柱在儲存或運輸過程中固定相可能會干掉,這會引起鍵合相的空間結構發生變化。因此,新的色譜柱在用來分析樣品之前,請一定要充分平衡色譜柱。C4反相色譜柱的平衡方法是:以純乙腈或甲醇作流動相,首先用低流速0.2ml/min將色譜柱平衡過夜(請注意斷開檢測器!),然后,將流速增加到0.8mL/min沖洗30min以便將色譜柱的填料充分平衡至*狀態。平衡過程中,將流速緩慢地提高直到獲得穩定的基線,這樣可以保證色譜柱的使用壽命,并且保證在以后的使用中,獲得分析結果的重現性。請一定確保所使用的流動相和乙腈-水互溶。如果您所使用的流動相中含有緩沖鹽,應注意首先用20倍柱體積的5%的乙腈-水流動相“過渡”,然后使用分析樣品的流動相直至得到穩定的基線。
對于正相色譜柱來講,硅膠柱或極性色譜柱需要更長的時間來平衡。這些色譜柱在出廠測試后是保存在正庚烷中的,如果極性色譜柱需要使用含水的流動相,請在使用流動相之前用乙醇或異丙醇平衡。C4反相色譜柱當使用乙醇、異丙醇、乙酸等粘度大的流動相時,色譜柱的平衡時間要延長,甚至要加倍。
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