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凝膠滲透色譜儀使用遇阻?五大妙招助你輕松過關!

更新時間:2025-06-05瀏覽:31次
  凝膠滲透色譜儀(GPC)是一種基于分子體積差異實現分離的分析儀器,主要用于高分子物質的分子量及其分布測定。其核心原理是利用多孔性凝膠作為固定相,當高分子溶液流經色譜柱時,分子體積大于凝膠孔徑的組分無法進入孔隙,直接通過色譜柱間隙快速流出;中等體積分子部分進入孔隙產生滯留效應;最小分子則完q滲透到所有孔隙中導致最長保留時間。這一過程遵循分子流體力學體積與保留時間的反比關系,從而實現分子量分級。
  該儀器主要由泵系統、進樣器、色譜柱和檢測系統組成。泵系統維持恒定流速,壓力上限可達600bar;檢測系統支持示差折光、紫外、光散射等多類型檢測器,可測定相對分子量、絕對分子量等參數。主流設備如東曹HLC-8420GPC、Polymer Char高溫GPC等均實現自動化操作與高精度檢測,部分型號柱溫可達250℃,支持高溫溶解后降溫析出樣品的測試。
  凝膠滲透色譜儀的常見問題及解決方法:
  1、柱相關問題
  柱堵塞
  原因:樣品中的雜質、溶劑殘留,或流動相中的物質在柱內析出等。
  解決方法:定期進行柱的清洗和保養;選擇合適的柱材料和適當的色譜條件,如過濾樣品、使用合適的流動相等;對于嚴重堵塞的柱子,可能需要更換新的色譜柱。
  柱老化或損壞
  原因:長時間使用、樣品超載、流動相pH值不合適、柱溫過高或過低等因素導致柱效降低、固定相流失等。
  解決方法:根據柱子的使用壽命和使用情況,適時更換新的色譜柱;控制進樣量,避免柱超載;調節流動相pH值在合適范圍,一般為3-7.5;保持柱溫穩定,避免溫度過高或過低對柱子造成損害。
  保留時間變化
  原因:流速不穩定、溫度波動、色譜柱老化、流動相組成改變、等度與梯度間未能充分平衡等。
  解決方法:檢查流速設置是否正確,必要時進行流速校正;確保柱溫恒定,可配置恒溫箱來控制溫度;用合適的流動相充分平衡柱子,使其達到穩定狀態;保持流動相組成的一致性,避免流速波動。
  2、檢測器問題
  噪聲問題
  原因:儀器連接和電源線問題、外部電磁干擾、檢測器光源不穩定、流動相中有氣泡、柱子或流路污染等。
  解決方法:檢查儀器的連接和電源線是否完好,排除外部電磁干擾的可能性;若噪聲信號仍然存在,可考慮更換或維修儀器;對于檢測器光源不穩定的情況,及時更換光源;對流動相進行脫氣處理,并在柱子后端加背壓;清洗柱子和流路,確保樣品純凈。
  漂移問題
  原因:儀器不穩定、色譜柱異常、檢測器故障等。
  解決方法:首先檢查儀器是否穩定,排除儀器本身的問題;同時檢查色譜柱是否正常,如有必要,可以更換新的色譜柱;若懷疑檢測器故障,可聯系廠家進行維修或校準。
  靈敏度低
  原因:光源老化、流動相配比不當、檢測器設置不正確等。
  解決方法:檢查光源是否老化,及時更換;調整流動相配比至合適范圍;優化檢測器設置,如調整檢測波長、增益等參數。
  3、進樣系統問題
  峰面積重復性差
  原因:進樣量不準確、樣品降解、檢測器響應不穩定等。
  解決方法:校準進樣系統,確保進樣量的準確性;檢查樣品的穩定性,如有必要,采取冷藏、避光等措施防止樣品降解;檢查檢測器響應是否穩定,若不穩定,需進行維修或更換。
  出現肩峰
  原因:樣品體積過大、樣品溶劑過強、柱塌陷或形成短路通道、柱內燒結不銹鋼失效、進樣器損壞等。
  解決方法:控制樣品體積,使總的樣品體積小于第一峰的15%;更換較弱的樣品溶劑,降低其洗脫能力;若柱塌陷或形成短路通道,需更換新柱子,并采用較弱腐蝕性條件;更換燒結不銹鋼部件,加在線過濾器過濾樣品;如進樣器損壞,及時更換進樣器轉子。
  4、數據處理問題
  鬼峰
  原因:進樣閥殘余峰、樣品中未知物、柱未平衡、水污染(反相)等。
  解決方法:每次使用后用強溶劑清洗進樣閥,改進閥和樣品的清洗方法;對樣品進行預處理,去除其中的未知物;用流動相作樣品溶劑重新平衡柱,尤其是離子對色譜;檢查水質量,確保使用HPLC級的水。
  基線不穩定
  原因:檢測器、泵或流動相的問題,如檢測器光源不穩定、泵有脈動、流動相有氣泡等。
  解決方法:更換光源、維修泵、排除流動相中的氣泡等;同時檢查軟件是否正常運行,數據采集卡是否損壞,通訊線路是否暢通,如有故障進行相應的重啟、更換或檢查修復操作。

凝膠滲透色譜儀

 

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